为探求小球藻快速生长所需营养条件,选用3种实验室常用的微生物培养有机质蛋白胨、酵母提取物、牛肉膏,在一定的光照强度和温度下,比较其对小球藻生长的影响。结果表明,蛋白胨对小球藻生长的促进作用最大,其次是牛肉膏,酵母提取物几乎不能促进小球藻生长;在蛋白胨质量浓度为1.00%时,小球藻的生物累积量达到最高;考虑到经济成本,蛋白胨的质量浓度以0.60%为宜。

小球藻营养丰富,含有蛋白质、核酸、糖类、脂类和微量元素等多种生物活性物质,具有显著增强免疫、抗癌、抗病毒等作用[1,2],广泛应用于食品与医药废水处理。鱼苗、虾苗的饲料要求既能提供丰富的营养物质,又能增强苗种的免疫抗病能力,因此,小球藻在水产养殖领域也有很高的应用价值[3]。目前,关于小球藻快速繁殖技术的报道较多[4,5,6,7,8,9,10],一般集中在无机盐培养条件下的快速繁殖技术上,未见在有机质(蛋白胨、酵母提取物和牛肉膏)培养条件下的快速繁殖技术研究。为此,作者选择3种实验室常用的微生物培养有机质(蛋白胨、酵母提取物和牛肉膏),研究其对小球藻生长的影响,以期找到一条短时间内扩繁大量小球藻的途径,为探索小球藻的营养利用方式提供依据。
1 实验
1.1 材料、试剂与仪器
小球藻(Chlorella zofingensis),武汉百意欣生物技术有限公司。蛋白胨、酵母提取物,Oxoid;牛肉膏,北京奥博星生物技术有限责任公司。
柠檬酸,EDTA-Na2,柠檬酸铁铵,NaNO3,K2HPO4,MgSO4·7H2O,CaCl2,Na2CO3,H3BO3,MnCl2·4H2O,ZnSO4·7H2O,Na2MnO4·2H2O,CuSO4·5H2O,Co(NO3)2·6H2O,均为国产分析纯。
SPX-300B-G型光照恒温培养箱,上海博讯实业有限公司医疗设备厂;i3型紫外可见分光光度计,济南海能仪器股份有限公司;AUY120型电子天平,日本SHIMADZU公司。
1.2 培养基的配制
参照文献[11]配制BG-11培养基。
1.3 方法
取400 mL BG-11培养基置于500 mL透明锥形瓶中,分别按质量梯度(0.0 g、1.0 g、2.0 g、3.0 g、4.0 g、5.0 g、6.0 g)加入121 ℃灭菌15 min的蛋白胨、酵母提取物和牛肉膏水溶液85 mL。在上述各锥形瓶中,无菌接种15 mL小球藻悬液(A680值为0.10),用棉塞塞住瓶口,以防污染;置于光照培养箱中,于光照强度为4 500 Lux、温度为25 ℃的条件下培养,每24 h取培养液(取培养液前后将锥形瓶置于25 ℃恒温摇床中150 r·min-1振荡15 min,保证小球藻分散均匀并充分和营养物质接触),测定其A680值,观察其生长情况。以未接种小球藻悬液的培养液(但含相应浓度的有机质)为空白对照,培养液起始A680值均为0。