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上海跃进使用超净工作台实施子宫摘除术净化ICR小鼠的研究

[导读]ICR远交系小鼠引自日本国立肿瘤研究所, 属瑞士种。该鼠具有繁殖水平高、生产周期短、生长发育快、体型适中、对环境及饲喂适应性强等特点, 广泛应用于药物评价、毒性试验和生物医学研究等领域。

1材料和方法1.1 实验室和设备清洁级动物实验室、超净工作台、生物净化层流柜、隔水式恒温水浴锅、手术器械、消毒缸等。实验室经2%过氧乙酸喷雾消毒, 开启空气净化系统, 在静态情况下运转2d。手术前lh开启超净工作台紫外线灯, 开启生物净化层流柜后一直保持于工作状态。手术器械、止血纱布棉球等物品经121℃, 35min高压蒸汽灭菌。1.2 保姆ICR小鼠为2002年从上海实验动物种子中心引进的 SPF级ICR小鼠, 合格证号:NO 0024361, 交配时间比剖腹产ICR小鼠提前3~4d。1.3 剖腹的ICR小鼠来自本中心普通级ICR小鼠, 饲养于普通环境, 交配时间比SPF级ICR小鼠延迟3~4 d, 交配后第2d提出雄鼠, 雌鼠单独饲养。1.4 剖腹取仔方法到预产期的孕鼠 (交配后20 d) , 断颈椎处死后, 立即用2%过氧乙酸浸泡2~3s, 然后置于超净工作台固定、剖腹, 用无菌止血钳夹住近肛门的子宫颈, 再用无菌剪从止血钳的肛门一侧剪断子宫, 取出子宫后, 置2%过氧乙酸浸泡1~2s, 快速切开子宫, 取出幼仔, 用无菌纱布将幼仔全身擦试干净, 擦去口、鼻部的羊膜、羊水, 切断脐带, 至体色由紫色转为鲜红色, 能够自由呼吸为止[1,2]。1.5 代乳在剖腹产所得的活幼仔中, 每只孕鼠的幼仔取6~8只, 用无菌运输盒转入生物净化层流柜中, 用SPF级ICR小鼠保姆代乳, 21d离乳, 然后将保姆鼠移出层流柜处死。1.6 微生物检测在1月龄和2月龄时, 随机抽取剖腹产小鼠按SPF级动物质量标准进行微生物和寄生虫检测, 以后每季度检测一次。2 结果2.1 剖腹净化到扩大生产此次剖腹净化ICR小鼠共繁育成功20只孕鼠, 成活幼仔120只, 目前扩大成♀种180只, ♂种90只的生产种群, 月供600~900只, 生长繁育状况正常。2.2 质量检测结果按照实验动物国家标准要求, SPF级动物应排除的病毒6种:小鼠肺炎病毒、呼肠孤病毒、大鼠细小病毒RV株、大鼠细小病毒H-1株、大鼠冠状病毒/大鼠泪眼腺病毒;细菌4种:嗜肺巴氏杆菌、肺炎克雷伯杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌;寄生虫2种:鞭毛虫、纤毛虫[3]。经实验室检测, 病毒、细菌、寄生虫均为阴性, 符合我国SPF级动物质量标准[3]。

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