血小板细菌污染是导致医院内输血传播性感染的主要原因, 可以导致输血受者出现败血症等严重的输血反应[1]。除了采用加强献血前征询、改进皮肤消毒剂和消毒程序、转移采集时最初的一部分血液等预防性措施外, 还可以采用细菌筛查减少临床相关的败血症[2,3,4]。北美洲和中国香港等对血小板采用需氧培养进行筛查, 而欧洲则同时进行需氧和厌氧培养。我们对浙江省血液中心采用Bac T/ALERT系统需氧和厌氧培养的9 758份单采血小板进行回顾性分析, 评估厌氧培养在血小板细菌筛查中的作用, 现报告如下。1 材料与方法1.1 仪器Bac T/ALERT3D全自动微生物培养检测系统, Bac T/ALERT血站需氧 (BPA) 和厌氧 (BPN) 培养瓶 (生物梅里埃) , Vitek 32全自动细菌鉴定系统 (生物梅里埃公司) , API细菌鉴定系统 (生物梅里埃公司) 1.2 取样单采血小板采集后在22℃振荡保存18-24 h后, 用无菌接管机连接样品袋, 并留取15 m L血小板样本。留取样本后的血小板按照临床的需求发放, 要求发放时无菌试验阴性。1.3 细菌检测在周围环境万级, 局部百级的无菌层流操作台上进行接种。每份样本分别接种1对Bac T/ALERT系统的血站专用需氧培养瓶 (BPA) 和厌氧瓶 (BPN) 。每份血小板样本需氧瓶和厌氧瓶分别接种5 m L, 剩余的5 m L样本热合后保存, 以备重复试验。接种后的培养瓶在Bac T/A-LERT 3D全自动液体培养系统中35℃孵育并自动监测。出现阳性信号的培养瓶送微生物实验室做细菌的分离鉴定, 否则连续监测7 d后报告阴性结果。1.4 重培养如Bac T/ALERT 3D出现阳性信号, 立即取样本袋中剩余的样本做重复培养, 如最初的血小板还未输注, 则再次取样接种培养。重复培养中阳性的培养瓶送微生物实验室做分离鉴定。1.5 检测结果的定义所有Bac T/ALERT 3D检测需氧或厌氧培养没有阳性信号的样本为阴性, 不再进一步确证其无菌。如出现阳性信号, 即初次培养阳性, 初次培养阳性的培养瓶中未分离出细菌的为假阳性, 分离出细菌为阳性。1.6 临床调查Bac T/ALERT出现阳性反应后, 未输注的单采血小板报废处理, 已输注的单采血小板, 对受血者进行追踪, 记录不良反应。2 结果本研究中共有9 758份单采血小板进行了培养, 有16份检测出阳性结果, 其中6份需氧和厌氧培养均报告阳性, 而其余10份仅厌氧培养报告阳性。需养培养和厌氧培养的阳性率分别为0.06% (6/9 758) 和0.16% (16/9 758) , 增加厌氧培养使细菌污染率从0.06%增加到0.16%。菌种鉴定的结果及阳性反应时间见表1。仅厌氧培养检出的细菌以疮疱丙酸杆菌等厌氧菌为主, 平均检出时间为 (96.8±18.21) h。仅金黄色葡萄球菌和溶血葡萄球菌污染的2份血小板在仪器报告阳性时 (需养培养和厌氧培养均阳性) 未临床输注, 其余的14份血小板在仪器报告阳性时均已输注, 经临床追踪调查无明显的不良反应。